常见问题
  • 冻存样本的接收与存储有哪些注意事项?
    1.细胞的冻存形态:请您在收到样本时检查冻存管中细胞的冻存形态,若冻存的细胞已融化,请您及时与我司联系,以免耽误后续实验; 2.细胞的标签信息:请您在确认细胞冻存形态正常时,确认细胞冻存管上面的信息,是否为您所需要的细胞类型、批次、规格; 3.存储方式:如以上信息确认无异常,请您在收到细胞后,24h内不使用时,可将细胞暂存于-80℃冰箱内或者干冰中,若长时间不用请直接保存于液氮中。
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  • 如何安全的进行细胞复苏?
    1.做好个人防护:在细胞复苏之前,请您严格按照二级防护标准进行穿戴胶乳手套、口罩、防护服、护目镜等个人防护装备 2.排出液氮小技巧:对于存储于液氮中的细胞,请用镊子取出,先将冻存管帽拧松半圈再拧紧,或者放入-80℃冰箱中5min之后取出,来释放进入冻存管中的液氮压力。 3.样本复苏:将冻存管置于37℃水浴中,轻轻搅拌直至冻存管中剩余一微小冰晶时取出(时间尽量控制在2分钟内,时间过长可能会造成细胞损伤风险)。水浴时注意不要让冻存管盖部分接触水,以降低污染风险。复苏完成后喷洒75%酒精迅速转移至生物安全柜中进行后续的操作。
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  • 为什么PBMC不推荐使用台盼蓝染色?
    1.台盼蓝染色原理:活细胞不被染色呈现中心透亮,死细胞能被跨膜染成实心的蓝色 2.台盼蓝染色的不足:1.台盼蓝染色时,原代细胞中的碎片、PBMC中残留的红细胞血小板等杂质碎片都可能被染色而被计数为死细胞;2.针对不同状态的细胞,台盼蓝着色的程度也不同,台盼蓝对于死细胞能完全染色,对于状态稍差的细胞也能部分着色而可能被标记为死细胞,从而导致计数活率与实际偏差较大(如下图1)。3.台盼蓝放置时间过久易结晶,导致结晶物也容易被计数成死细胞而影响细胞计数的数量与活率 3.作为原代的PBMC,细胞悬液中会存在红细胞血小板等碎片,且细胞状态不一致,因此导致台盼蓝染色的计数结果与实际有较大偏差 1.图片引用自中国生物器材网《台盼蓝、AO/PI荧光计数、明场计数染色法区别及所适用细胞样品类型》
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